我们设计了一条 Fluorescence-PNA-Peptide PNA探针，序列如下。Thiazole orange (TO) dye 作为一个碱基插入到PNA中，PNA的C短连有一段多肽，有助于PNA进入细胞。当这条TO-PNA-Peptide 没有跟目标mRNA 结合时，发出的荧光信号非常弱，如果TO-PNA-Peptide 跟目标mRNA结合，则发出的荧光信号强5-6倍。

体外试验：TO-PNA-Peptide 跟完全配对的mRNA杂交时，信号比单独的TO-PNA-Peptide 强6倍，如果TO-PNA-Peptide 跟有一个位点不配对的mRNA 一起，则发出的荧光仅仅强3倍。体内试验的结果跟体外试验的结果相差不多。

可以设想，针对某个已知突变的mRNA，设我们可以计一条与这个已知突变完全互补的PNA，就可以根据荧光的强弱来探测是否纯在这个突变。

TO-PNA-Peptide

TO-PNA-Peptide 与完全配对的mRNA 结合

Bioconjug Chem. 2014 Sep 17; 25(9): 1697–1708.